摘要目的 探究突变蛋白K488X-menin在多发性内分泌腺瘤1型(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN1)降解的机制.方法 以中国贵州黔南平塘1个具有MEN1的3代大家庭为研究对象,收集先证者临床相关的病史和临床资料,全外显子(whole exome sequencing,WES)、一代测序检测致病基因;用生物信息学对野生型menin(WT-menin)和突变体menin(K488X-menin)蛋白结构进行分析;基因克隆构建野生型质粒、定点突变技术构建突变型质粒,转染到293T细胞中,并用放线菌酮(cycloheximide,CHX)和蛋白酶体抑制剂(MG132)单独或先后作用于转染了质粒的293T细胞,Western blot分析WT-menin和K488X-menin蛋白表达水平;免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)分析 K488X-menin 与热休克蛋白 70(heat shock protein 70,Hsp70)、热休克蛋白 70羧基末端反应蛋白(carboxyl terminus of hsp70-interacting professional,CHIP)相互作用情况;体外泛素化分析me-nin、Hsp70、CHIP与泛素之间的相关性.结果 MEN1先证者影像学结果支持MEN1的临床诊断,并在MEN1家族中仅发现先证者和其儿子存在MEN1 exon 10 c.1462A＞T突变;Western blot实验表明K488X-menin蛋白出现截断和表达下调(P＜0.05);K488X-menin可以被CHX阻止蛋白质合成,而蛋白酶体抑制剂MG132可以逆转CHX作用的蛋白下调(P＜0.05);Co-IP证实WT-menin和K488X-menin与Hsp70均可发生蛋白相互作用,Hsp70或(和)CHIP使K488X-menin蛋白表达出现下调,并且Hsp70和CHIP共同作用使K488X-menin蛋白表达显著下调和K488X-menin泛素化(P＜0.05).结论 突变体K488X-menin蛋白表达不稳定,通过Hsp70和CHIP参与的泛素-蛋白酶体系统的泛素化降解,导致抑癌作用丧失,诱导MEN1疾病的发生.