换一批
换一批摘要目的 建立检测土拨鼠肝炎病毒(WHV)核心抗体的ELISA方法,应用于WHV感染的中国旱獭动物模型的研究.方法 原核表达重组WHcAg,氯化铯密度梯度离心获得非变性的纯化蛋白;用该纯化蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体;建立竞争抑制ELISA方法用于检测旱獭血清中的抗-WHc.结果 纯化后的蛋白浓度达0.86 mg/mL,纯度达89.48%;免疫小鼠后获得抗血清,ELISA间接法显示其多克隆抗体效价达1:640 000,Western blot分析显示该抗体能特异识别WHcAg;建立的竞争抑制ELISA方法对旱獭血清中可能存在的抗-WHc进行检测,诊断特异性及敏感性均较好,重复测定的批内变异系数和批间变异系数均小于10%.结论 成功地建立检测旱獭血清中抗-WHc的竞争抑制ELISA方法.该方法具有稳定、简便、特异、敏感的特点,适用于大量旱獭血清抗-WHc的筛查工作,为进一步研究中国旱獭这一新型乙型肝炎病毒动物模型奠定了基础.
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分类号
R5
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1008-1704.2007.03.007
发布时间
2007-08-13
基金项目
国家重点基础研究发展计划(973计划)
国家自然科学基金
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