换一批采用Cre-loxP技术构建肝脏特异性Trappc11基因敲除小鼠模型
Establishment of a liver-specific Trappc11 gene knockout mouse model using the Cre-loxP system
摘要目的 采用Cre-loxP系统构建肝脏组织特异性Trappc11基因敲除小鼠(Trappc11flox/flox-Alb-Cre+/-)模型以探究脂肪肝的发病机制.方法 用带有loxP位点的Trappc11纯合子小鼠(Trappc11flox/flox)和带有Alb-Cre的转基因小鼠(Alb-Cre+/-)进行杂交,对其子代进行基因型鉴定.筛选出Trappc11fllox/+-Alb-Cre+/-小鼠,将其与Trappc11fox/flox小鼠进一步杂交可获得Trappc11肝脏特异性敲除鼠.将3～4周龄的Trappc11flox/flox-Alb-Cre+-、Trappc11flox/+-Alb-Cre+/-和Trappc11flox/flox-Alb-Cre-/-小鼠各3只,提取各组织脏器中的DNA,检测Trappc11的敲除效率和特异性.然后,在mRNA和蛋白质水平进一步验证.于第4周开始监测摄食量和体重等指标.结果 我们成功繁育出肝脏特异性Trappc11基因敲除鼠,敲除心、脾、肺、肾、胰腺、肌肉、脂肪和脑组织中该基因表达未受影响,mRNA水平敲除效率达85％以上且TRAPPC11蛋白水平下降.该敲除鼠目前生长状态良好,饮食饮水正常,可用于后期繁殖与机制研究.结论 已经构建成功的Trappe11flox/flox-Alb-Cre+/-鼠将为探索Trappc11在肝脏中的生理病理作用提供在体模型.
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关键词
转运蛋白颗粒复合物亚基11Cre-loxP重组酶系统组织特异性敲除Trafficking Protein Particle Complex Subunit 11Cre-loxP recombinase systemTissue specific knockout
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1008-1704.2024.09.031
发布时间
2024-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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