摘要目的 探讨在脂毒性环境下,肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSEC)中髓样上皮生殖酪氨酸激酶(myeloid-epithelial-reproductive tyrosine kinase,Mertk)的表达对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响及作用机制.方法 在人肝窦内皮细胞株(TMNK-1)中运用质粒转染的方法过表达Mertk(ov-Mertk)或敲减Mertk(sh-Mertk).在上述质粒转染或未转染的LSEC中用棕榈酸(PA)处理以模拟高脂环境,共分为6组,分别为PA、BSA(高脂对照组)、ov-Mertk+PA、vector+PA(高脂 Mertk 过表达对照组)、sh-Mertk+PA、sh-NC+PA(高脂 Mertk 敲减对照组).用Transwell将上述6组LSEC与人肝癌细胞株(HepG2)共培养.qPCR及蛋白质印迹检测LSEC对肝细胞脂质代谢、炎症反应和增殖相关因子的影响.EdU检测HepG2细胞的增殖活性.结果 当高脂或高脂Mertk过表达处理的LSEC与肝细胞共培养后,肝细胞中促进脂肪合成的脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)的基因表达增加,促进脂肪分解的过氧化物酶体增殖激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPAR-α)的基因表达减少,而在高脂Mertk敲减时上述情况得到逆转(BSA 比 PA,FAS:1.00±0.16 比 1.91±0.16,P=0.002,PPAR-α:1.07±0.10 比 0.74±0.14,P=0.028;PA+vector 比 PA+ov-Mertk,FAS:1.79±0.28 比 2.57±0.39,P=0.049,PPAR-α:0.70±0.04 比 0.48±0.13,P=0.049;PA+sh-NC 比 PA+sh-Mertk,FAS:1.93±0.29 比 1.37±0.16,P=0.045,PPAR-α:0.70±0.12 比0.95±0.06,P=0.035).当高脂或高脂Mertk过表达处理的LSEC与肝细胞共培养后,肝细胞中促进炎症反应的IL-1β基因表达增加,而在高脂Mertk敲减时IL-1β的基因表达减少(BSA比PA,1.17±0.16比2.51±0.23,P=0.001;PA+vector 比 PA+ov-Mertk,2.37±0.15 比 3.81±0.33,P=0.002;PA+sh-NC 比 PA+sh-Mertk,2.41±0.28 比 1.62±0.12,P=0.011).当高脂或高脂Mertk过表达处理的LSEC与肝细胞共培养后,肝细胞中促进细胞增殖的细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的基因表达增加,而在高脂Mertk敲减时CyclinD1 和 PCNA 的基因表达下调(BSA 比 PA,PCNA:1.02±0.03 比 1.55±0.27,P=0.026,CyclinD1:1.13±0.13比 1.47±0.09,P=0.019;PA+vector 比 PA+ov-Mertk,PCNA:1.57±0.20 比 2.04±0.16,P=0.032,CyclinD1:1.29±0.44 比 2.32±0.35,P=0.034;PA+sh-NC 比 PA+sh-Mertk,PCNA:1.51±0.30 比 0.98±0.13,P=0.048,CyclinD1:1.42±0.09比1.11±0.16,P=0.045).EdU结果显示,肝细胞在与高脂或高脂Mertk过表达的LSEC共培养后,处于增殖状态的肝细胞数量增加,相反,在与高脂Mertk敲减的LSEC共培养后,处于增殖状态的肝细胞数量减少[BSA:(12.86±3.38)％比 PA:(49.15±4.5)％,P=0.0004;PA+vector:(42.15±8.43)％比 PA+ov-Mertk:(65.41±0.66)％,P=0.009;PA+sh-NC:(48.19±3.11)％比 PA+sh-Mertk:(28.44±1.96)％,P=0.001].结论 过表达Mertk的LSEC可以促进脂毒性肝细胞的脂肪合成、炎症反应和细胞增殖,起到促进NASH的作用.敲减LSEC中的Mertk可以作为NASH治疗的靶点.