换一批
换一批磷酸酶抑制比色法快速测定贝类中腹泻性贝毒素
Rapid Determination of Diarrhetic Shellfish Poisoning in Shellfish by Colorimetric Protein Phosphatase Inhibition Assay
摘要基于腹泻性贝毒素(Diarrhetic shellfish poisoning,DSP)的致腹泻性组分大田软海绵酸(okadaic acid,OA)及其衍生物鳍藻毒素(dinophysistoxins,DTXs)能抑制蛋白磷酸酶活性的特点,建立了快速测定贝类中DSP的磷酸酶抑制比色分析方法.采用对硝基苯磷酸二钠(p-nitrophenyl phosphate disodium,p-NPP)为底物,其与蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)反应生成的黄色水解产物在碱性条件下于405 nm波长处有强烈的吸收峰,根据吸光废值计算抑制剂的浓度.酶抑制法继承了小鼠生物法能建立剂量-效应关系的优势,直接反映毒素的相对毒性大小,测定的是DSP毒素致腹泻性成分的总量,以OA浓度计.本研究优化了样品前处理方法并考察了基质浓度的影响.方法的筛选检出限为80 μg/kg.采用该方法进行加标回收实验,回收率在90.43％～118.52％范围内,相对标准偏差(RSD)为6.85％～13.93％.该方法操作简便、快捷,回收率高,重现性好,可作为快速筛查工具用于贝毒的日常监控.
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关键词
磷酸酶比色法大田软海绵酸腹泻性贝毒素贝类phosphatasescolorimetric analysisokadaic aciddiarrhetic shellfish poisoningshellfish
栏目名称
食品安全与检测
发布时间
2014-08-14
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