换一批超高效液相串联质谱测定四棱豆中总叶酸和多聚谷氨酸叶酸的含量
Determination of Total Folate Content and Polyglutamate Folate Distribution in Winged Beans Using UPLC-MS/MS
摘要本文建立了超高液相色谱串联三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)定量测定四棱豆中总叶酸的含量和多聚谷氨酸叶酸分布的方法.四棱豆在缓冲液中蒸煮灭活内源多聚谷氨酸水解酶和破坏叶酸结合蛋白,使结合态叶酸变成游离态,过滤得提取液.将提取的各种形式叶酸转化为5-甲基四氢蝶酰多聚谷氨酸(5MTHFGlun),并经C18萃取小柱除盐后,采用UPLC分离不同形态的5MTHFGlun,电喷雾正离子电离模式(ESI+)和多反应监控扫描模式(MRM)测定不同形态的5MTHFGlun含量.方法采用PteGlu(1-6)作为内标,5MTHFGlu{1-6)外标进行定量.该方法灵敏度高,最低检测限(LOD)为40～1133 fmol,最低定量限(LOQ)为120～3400 fmol,精密度为0.5％～6.8％,平均回收率为43％.研究发现四棱豆中多聚谷氨酸叶酸的主要形式是蝶酰五谷氨酸,占叶酸总量的65％;其次是蝶酰五谷氨酸占30％;其它形式只占5％;总叶酸含量为1.1 μmol/100 g,其含量显著高于菠菜和西兰花等蔬菜.该方法快捷、灵敏、精确,适用于蔬菜中叶酸的分析.
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关键词
UPLC-MS/MS总叶酸多聚谷氨酸叶酸四棱豆ultra-performance liquid chromatography tandem mass-spectrometrytotal folatepolyglutamate folatewinged bean
栏目名称
DOI
10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.10.048
发布时间
2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31201404）
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