换一批
换一批利用重组大肠杆菌发酵甘油合成L-丙氨酸
L-Alanine Production via Fermentation of Glycerol by Recombinant Escherichia coli
摘要本文探究以甘油为唯一碳源发酵合成L-丙氨酸的可行性.以删除了乙酸、甲酸、乙醇、琥珀酸、乳酸代谢产物合成途径的Escherichia coli B0016-050为出发菌株,用λpL启动子及其调控下的嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源的丙氨酸脱氢酶基因(alaD)替换B0016-050菌株染色体上丙氨酸消旋酶基因(dadX),获得温度控制型L-丙氨酸合成菌株B0016-060BC.菌株B00 16-060BC以甘油为唯一碳源进行两阶段发酵(包括菌体生长阶段和L-丙氨酸合成阶段),表明在菌体生长至对数后期起始L-丙氨酸合成或者提高L-丙氨酸发酵阶段的通气量可提高L-丙氨酸合成水平.进一步经5L发酵罐发酵,可合成63.64g/LL-丙氨酸,整个发酵阶段体积生产强度达到1.91 g/(L·h)、转化率达到62.89 g/100g甘油,仅合成少量的乙酸(1.73 g/L)等副产物.实现了以甘油为唯一碳源高效合成L-丙氨酸,为工业应用提供了重要参考.
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关键词
L-丙氨酸甘油大肠杆菌发酵代谢工程基因开关L-alanineglycerolEscherichia colifermentationmetabolic engineeringgenetic switch
栏目名称
工艺技术
DOI
10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.12.035
发布时间
2016-02-25
基金项目
国家自然科学基金
江苏省自然科学基金
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