换一批
换一批通过串联启动子实现纳豆激酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达
Efficient Overexpression of Recombinant Nattokinase in Bacillus subtilis by Tandem Promoters
摘要本研究通过串联启动子方式实现纳豆激酶在枯草芽孢杆菌WB800中的高效分泌表达.通过对几种现有报道的强启动子的比较并对其进行串联操作,确定生产纳豆激酶的最优启动子及纳豆激酶的最高产量.本研究首先在枯草芽孢杆菌WB800中成功构建五种含不同强启动子的重组质粒pSG101(PHpaⅡ),pSG102(PBcaprE),pSG103(Pluxs),pSG104(gsiB)和pSG105(PyxiE),实现纳豆激酶分泌表达,并对其纤溶活性进行测定.结果表明,启动子PHpaⅡ介导的纳豆激酶纤溶活性(110.80 FU/mL)明显优于其他四种启动子.通过对启动子HpaⅡ进行多次串联,成功构建质粒pSG106(HpaⅡ-P HpaⅡ),pSG107(PHpaⅡ-PHpdrPHpaⅡ)和pSG108(P HpaⅡ-P HpaⅡ-PHpaⅡ-PHpaⅡ).数据显示,菌株Bacillus subtilis WB800/pSG 107(HMrP HpaⅡ-P HpaⅡ)纳豆激酶产量最高为213.30 FU/mL,相比单个启动子P HpaⅡ,提高了92.51％.通过对五种强启动子的比较以及对其进行串联操作,成功实现纳豆激酶在枯草芽孢杆菌WB800的高效表达,纤溶活性最高为213.30 FU/mL,与现有相关报道相比有明显优势.
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10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.11.011
发布时间
2017-01-05
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