基于Exo Ⅲ信号放大的荧光适配体传感器检测Kunitz型大豆胰蛋白酶抑制因子
Detection of the Kunitz Soybean Trypsin Inhibitor Using a Fluorescence Aptamer Biosensor Based on Exo Ⅲ Signal Amplification
摘要Kunitz型大豆胰蛋白酶抑制因子(Kunitz Soybean Trypsin Inhibitor,KTI)是一种很关键的抗营养因子,不仅对动物消化系统和生长发育有不良影响,还制约各个行业对大豆的利用率,因此快速有效的检测方法是非常必要的.该研究建立一种基于核酸外切酶Ⅲ(ExonucleaseⅢ,ExoⅢ)和碳纳米颗粒(Carbon Nanoparticles,CNPs)的信号辅助放大荧光传感体系用于KTI的检测.具体体系包括KTI适配体(Aptamer,APT)、互补链(Complementary DNA,cDNA)、信号探针(Signal Probe,SP)、ExoⅢ和CNPs共5个部分.通过可行性分析和CNPs浓度优化试验,测得KTI在100~600 ng/mL范围内呈线性相关,检测限为12.59 ng/mL.以豆浆作为样品,采用加标回收测得回收率为97.42%~102.85%,RSD在0.61%~2.36%之间,该方法可对实际样品中的KTI进行测定.
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