换一批乳及乳制品中乳铁蛋白含量的快速SDS-PAGE荧光检测方法
Rapid SDS-PAGE Fluorescent Detection Method for Lactoferrin Content in Milk and Dairy Products
摘要该研究采用新型的Chromeo P503(P503)染料替代考马斯亮蓝染色方法,以克服脱色染色步骤繁琐、耗时长(≥5 h)的不足,建立一种乳及乳制品中乳铁蛋白的快速简便十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)检测方法.P503 染料标记蛋白产生强烈的红色荧光发射,在 30 min内一步操作即可完成,并且进行脱铁处理后消除乳铁蛋白铁饱和度对于荧光信号的干扰,保证定量的准确性.根据凝胶成像图中 78 ku蛋白条带是否存在及其灰度值的大小,实现乳铁蛋白的定性与定量检测.在优化的实验条件下,线性范围为 15～75 μg/mL,检出限为 5.11 μg/mL,加标回收率在 75.79%～108.09%之间,表明该方法具有较高的灵敏度和准确性.SDS-PAGE和P503 结合无需进行肝素亲和柱前处理,便可直接应用于乳及乳制品中乳铁蛋白快速简便的准确定量检测,P503 染料标记还可以用于其它乳蛋白的SDS-PAGE快速低成本定量检测,从而为乳品质量控制和营养评价及加工工艺研究提供有力工具.
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关键词
乳铁蛋白十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳Chromeo P503快速标记lactoferrinsodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresischromeo p503rapid staining
栏目名称
DOI
10.13982/j.mfst.1673-9078.2024.4.0968
发布时间
2024-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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