珍珠母肽酶解工艺的优化及对人肝癌细胞HepG2能量代谢的影响
Optimization of Enzymatic Hydrolysis of Nacre Peptide and Its Effects on Energy Metabolism of Human Hepatoma Cells(HepG2)
摘要该研究以水解度为指标,仿生酶用量、提取时间、提取温度为条件因素,设计Box-Behnken响应方案,对珍珠母肽酶解条件进行优化;同时研究其不同质量浓度的珍珠母肽对HepG2 肝癌细胞的抑制作用的影响.最佳酶解工艺条件为:温度 55℃,调节pH值为 2.0,加入胃蛋白酶质量分数 1%,酶解 2.6 h后,pH值调节为 8.0,加入胰蛋白酶质量分数1.7%,酶解 3 h,此时珍珠母肽水解度为31.21%;基于此酶解条件获得珍珠母肽进行对肝癌细胞抑制作用,研究实验结果显示不同质量浓度珍珠母肽(12.5、25、50、100、200 μg/mL)与氯化钴(CoCl2)诱导的HepG2 肝癌细胞缺氧模型相比较,均可抑制细胞存活率,珍珠母肽中氨基酸结果显示,精氨酸可能参与抑制肝癌细胞增殖,从能量代谢的角度说明珍珠母肽可通过减少三磷酸腺苷的生成和降低乳酸、己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶能量代谢关键酶活力达到抑制HepG2细胞增殖的目的,可为珍珠母肽的制备工艺提供参考,为其开发利用提供一定的理论基础.
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