动物源食品中孕酮激素残留的时间分辨荧光免疫分析法的建立
Establishment of Time-resolved Fluorescence Immunoassay for Progesterone Residues in Animal-derived Foods
摘要该研究以孕酮为研究对象,设计并制备了新抗原,通过动物免疫得到特异性兔抗体,基于所得抗原和抗体,进一步优化了抗原抗体浓度、反应缓冲液种类及其pH值等关键参数,最终在国内首次建立了用于动物性食品中性激素孕酮残留快速检测时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA).该研究确定最优实验条件为:抗原 0.30 μg/mL、铕标抗体 0.40 μg/mL、pH值 7.2 的TBST工作缓冲液,并建立标准曲线,方法的线性范围为 0.46~6.94 μg/L,IC50达 1.79 μg/L,与睾酮交叉反应率为 1.25%,与雌二醇、雌三醇等激素无交叉反应.实际样品的平均添加回收率为82.0%~113.0%,批内批间变异系数<5%,与高效液相色谱法(HPLC)检测结果的相关性良好(r2=0.988).结果表明该研究所建立的TRFIA检测方法准确可靠、特异性好、灵敏度高,完全可用于动物源食品中孕酮残留的快速检测.
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