米糠耐热脂肪酶的提取及粗酶特性初探
Extraction of Heat-resistant Lipase from Rice Bran and Preliminary Investigation on the Characteristics of Crude Enzyme
摘要米糠脂肪酶使米糠发生酸败,常规热处理方法难以完全灭活米糠内源脂肪酶.为评价米糠中耐热脂肪酶的存在,该研究以湿热稳定化处理的米糠为原料,考察表面活性剂类型及浓度对米糠粗酶液脂肪酶活性影响,进一步比较两种脂肪酶特性,曲拉通-磷酸盐米糠脂肪酶(TRBL)和磷酸盐米糠脂肪酶(PRBL).采用10 mmol/L表面活性剂提取粗酶液脂肪酶活性显著升高,其中曲拉通组效果最优.对比TRBL和PRBL性质发现,PRBL最适反应温度和pH值分别为30 ℃和7.0;而TRBL最适反应温度超过100 ℃,且具有较好耐热性,其最适反应pH值为3.0和7.0;两种粗酶液脂肪酶水解不同碳链的底物无显著特异性;Ba2+和Zn2+都能激活粗酶液脂肪酶活性,但Ba2+对TRBL脂肪酶活性激活作用远高于PRBL组;K+和Fe3+分别对PRBL和TRBL脂肪酶活性具有最大抑制作用;相比于PRBL,TRBL具有更好的有机溶剂耐受性,且甲醇对TRBL脂肪酶活性具有激活作用.研究证明了稳定化米糠中存在能耐受温度和有机溶剂的脂肪酶,为深入挖掘新型米糠脂肪酶提供了理论依据.
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