羊胎盘抗肿瘤活性蛋白多肽的制备分离
Preparation and Isolation of Anti-tumor Active Proteins and Polypeptides from Sheep Placenta
摘要以羊胎盘为原料,蛋白含量和MTT肿瘤抑制活性作为评价指标,筛选羊胎盘抗肿瘤活性蛋白多肽组分的提取和制备工艺.结果表明,混合磷酸盐缓冲溶液搅拌提取法可用于制备具有结肠癌抑制活性的羊胎盘提取物.其具体条件为:pH值为 7.4 的混合磷酸盐缓冲溶液(其中含 0.9 wt.%的NaCl溶液,50 mmol/L常规PBS溶液,0.5~1 mmol/L苯甲基磺酰氟),提取温度 4~10℃,提取 2 h,总提取物得率为 37.91%,蛋白含量为 55.62%.抗肿瘤活性结果表明当提取物质量浓度为 2 mg/mL,作用于HT-29 细胞和HCT-116 细胞抑制率分别 56.88%和53.07%.总提取物经Sephadex-G-25 凝胶柱层析分离纯化得到 2 个对结肠癌HT-29 和HCT-116 细胞株具有良好抑制活性的蛋白多肽组分F2 和F3.抗肿瘤活性测试F2 组分的IC50 值分别为 0.328 mg/mL和 0.183 mg/mL,F3 组分的IC50 值分别为 0.213 mg/mL和 0.095 mg/mL.综上证实羊胎盘混合磷酸盐提取物经凝胶柱层析得到的活性蛋白多肽组分具有良好的抑制结肠癌细胞活性,可为羊胎盘废弃物的有效开发,综合利用提供理论与技术支撑.
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