凝胶色谱法检测特医配方婴儿乳粉中肽分子量分布
Determination of Molecular Weight Distribution of Peptides in Infant Formula for Special Medical Purposes by Gel Chromatography
摘要对特殊医学配方婴儿乳粉进行pH偏移处理测定其肽分子量分布.水解蛋白配方乳粉和氨基酸配方乳粉分别用水溶解,经碱偏移处理(pH值调至12静置90 min后调回至7)后收集上清液,采用TSK-Gel g2000WXL(7.8 mm×300 mm,5 μm)凝胶色谱柱,流动相为30%乙腈(含0.1%三氟乙酸,体积分数),流速为0.5 mL/min,波长为220 nm,柱温为25 ℃,进样量为10μL,以7种蛋白标准品的分子量对数(lgMW)与保留时间做校正曲线,并使用GPC软件进行数据处理.该法用于特医乳粉中肽分子量分布测定的线性为0.994 5,精密度为0.26%~1.29%.使用本方法检测了 9种品牌共29批次特医配方乳粉.结果表明,氨基酸配方乳粉中小于500 u的组分含量可达97.48 wt.%以上,乳蛋白深度水解配方乳粉中小于3 000 u的肽含量可达98.57 wt.%以上,乳蛋白部分水解配方乳粉的肽分子量分布随品牌差异结果各异.碱偏移处理可明显改善乳蛋白部分水解配方乳粉的溶解性,有利于充分展现乳粉中肽段全貌.该法前处理简单,具有良好的重复性和稳定性,可用于特殊医学配方婴儿乳粉中肽段分布的分析.
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