酶法制备2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸的分离纯化工艺及抗氧化活性分析
Separation and Purification Processes of 2-O-α-D-Glucopyranosyl-L-Ascorbic Acid Prepared Enzymatically and Analysis of Its Antioxidant Activity
摘要该研究以L-抗坏血酸和β-环糊精为底物,在海洋环糊精葡萄糖基转移酶MY20的催化下制备了 2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G),研究了其分离纯化工艺和抗氧化活性.通过使用阳离子离子交换树脂SK1B和阴离子离子交换树脂WA30,重点优化了阴离子交换树脂WA30分离AA-2G的工艺参数,通过响应面试验确定了最佳工艺参数为:洗脱液浓度0.15 mol/L、洗脱液流量3 mL/min、洗脱液pH值为7,在该条件下纯化AA-2G的纯度为91.23 wt.%,回收率89.92 wt.%;在此基础上,建立了多步纯化工艺,使AA-2G的纯度由最初的50.31 wt.%提高到了 95.62 wt.%,纯度提高了 1.90倍,回收率达到85.12 wt.%;对制备的AA-2G进行体外抗氧化性分析发现,AA-2G对超氧阴离子、羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为91.63%、90.21%和95.20%,验证了酶法制备的AA-2G具有抗氧化活性.该研究可为高纯度AA-2G的开发提供理论依据.
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