换一批地龙胰脂肪酶抑制肽的制备、结构鉴定及活性分析
Preparation,Structural Identification,and Activity Analysis of Pancreatic Lipase Inhibitory Peptide from Earthworm Protein
摘要为制备具有高效胰脂肪酶抑制活性的地龙蛋白肽,本研究结合地龙内源酶和商业酶的优势,采用两步酶解法对地龙蛋白进行水解,并以胰脂肪酶抑制率为评价指标,采用单因素试验和正交试验对第二步酶解工艺进行优化.此外,对酶解产物进行超滤、凝胶柱分离,并运用LC-MS/MS、分子对接等技术结合PeptideRanker数据库筛选具有较高胰脂肪酶抑制活性的肽段.结果表明,第二步酶解的最优工艺是:料液比为1:2(50%,m/m),碱性蛋白酶用量为6.0×104 U,温度为 50℃,pH值为 9.5,酶解时间为 3 h.在此条件下,胰脂肪酶抑制率可达 53.92%,水解度为 41.98%,可溶性肽得率达到 89.17%.共筛选得到 10 条亲和力高、生物活性好且无毒的肽段,分别为GDAPPFFP、YPFDPGP、WGPDLP、FDFP、DDFFR、FLDF、SDDGFF、FDDF、SDDFF和WDDFF.小分子肽及氨基酸可能是地龙蛋白发挥胰脂肪酶抑制作用的主要物质基础,本研究为理解地龙蛋白的降脂活性提供了新视角,为后续研究地龙蛋白功能肽的构效关系和胰脂肪酶抑制作用机理机制提供了条件.
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关键词
地龙蛋白自溶酶解工艺优化分子对接胰脂肪酶抑制earthworm proteinautolysis enzymatic hydrolysisprocess optimizationmolecular dockingpancreatic lipase inhibition
栏目名称
DOI
10.13982/j.mfst.1673-9078.2026.1.1634
发布时间
2026-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省重点领域研发计划项目（2022B0202020003）
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