三叶青地上部分总黄酮的分离纯化、组分分析及其对急性肝损伤小鼠的保护作用
Purification,Component Analysis,and Protective Effects of Total Flavonoids from Aerial Parts of Tetrastigma hemsleyanum Diels & Gilg on Acute Liver Injury in Mice
摘要为了优化三叶青地上部分总黄酮(Total Flavonoids from Aerial Parts of Tetrastigma hemsleyanum,TFATH)的大孔树脂纯化工艺,并探讨其对四氯化碳(Carbon Tetrachloride,CCl4)诱导急性肝损伤小鼠的保护作用,采用单因素实验考察不同上样条件和洗脱条件对纯化效果的影响,测定三叶青地上部分样品纯化前后的抗氧化活性,超高效液相串联飞行时间质谱技术(UPLC-ESI-QTOF-MS2)对TFATH进行定性分析,并构建CCl4诱导的急性肝损伤模型.结果显示,纯化后样品黄酮纯度由8.99%增至31.38%,抗氧化能力也显著提高,并从其中检测出了 12种黄酮类物质,主要为(iso)vitexin、(iso)orientin及其糖苷化合物.动物实验结果表明,与模型组相比,TFATH给药组小鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著降低9.74%、12.91%和33.98%,肝细胞变性、坏死及炎性浸润现象明显改善;肝组织中GSH含量和CAT活性分别提升 54.14%、50.88%,MDA 含量显著降低 66.53%;另外,TFATH 干预可显著下调 TNF-α、IL-1β、IL-6、Caspase-3、Bax和Keapl基因的表达,上调Bcl-2、Nrf2、HO-1、NQO1及GCLC基因的表达.综上所述,TFATH通过激活Keap1/Nrf2信号通路,调节氧化应激,减轻炎症反应,降低促炎因子的表达并抑制肝细胞凋亡,从而全方位地改善CCl4引起的急性肝损伤.该结果为三叶青地上部分资源的开发利用提供理论参考依据.
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