应用环介导等温扩增技术快速检测血培养阳性瓶中的七种常见病原菌
The Application of loop-mediated isothermal amplification in positive blood bottles for the detection of seven common pathogenic bacteria
摘要目的:采用环介导等温扩增(LAMP)技术扩增血培养瓶阳性标本中病原菌的DNA,实现血流感染病原体的快速检测.方法:设计七种常见血流感染病原菌的LAMP特异性引物;应用LAMP技术分别检测七种菌的标准菌株和5株临床菌株,验证引物的特异性;回顾性实验应用LAMP检测已用传统鉴定方法确证过的血培养阳性标本;前瞻性实验应用LAMP与传统培养方法同时检测血培养阳性标本;统计分析该方法检测血流感染病原体的特异性、灵敏度等临床性能.结果:回顾性实验显示该技术的灵敏度为93%,特异性达100%,准确度为94.80%,整体和单个菌的检测数据通过χ2检验计算后都显示其与传统技术无统计学差异.前瞻性实验显示该技术的灵敏度为83%、特异性为100%,准确度为88.23%,与传统技术有较好的一致性,无统计学差异;该技术还能检测混合感染,优于其他核酸检测技术.结论:LAMP技术有快速简便、高灵敏度、高特异性等特点,作为血液感染的实验室诊断手段具有较好的应用前景.
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