金丝桃苷对过敏性哮喘小鼠Th9、Th17、Treg细胞分化及气道炎症的影响
Effect of Hyperoside on Th9,Th17,Treg Cell Differentiation and Airway Inflammation in Allergic Asthmatic Mice
摘要[目的]观察金丝桃苷对过敏性哮喘小鼠辅助性T(Th)9、Th17、调节性T(Treg)细胞分化及气道炎症的影响.[方法]将60只雄性BALB/c小鼠随机分为5组,即正常组,模型组,金丝桃苷低、高剂量组,地塞米松组,每组12只.除正常组,其他各组小鼠采用卵清蛋白(OVA)诱导法构建过敏性哮喘模型.给药结束后,观测吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)和肺动态顺应性(Cldyn),评估肺功能,采用苏木素-伊红(HE)以及高碘酸希夫(PAS)染色法评估肺部组织病理学变化,流式细胞术分析脾脏Th9细胞、Th17细胞和Treg细胞比例,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-9、IL-10、IL-17A和转化生长因子(TGF)-β1水平,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测肺组织中IL-9、IL-10、IL-17A和TGF-β1 mRNA表达水平,通过免疫组织化学法和Western Blot法检测肺组织中PU.1、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和叉头状转录因子3(Foxp3)蛋白表达水平.[结果]与模型组比较,金丝桃苷高剂量组小鼠哮喘发作症状减轻,Ri和Re显著降低、Cldyn显著升高,BALF中白细胞总数、EOS数量显著降低,Th9和Th17细胞比例降低、Treg细胞比例升高,IL-9和IL-17A在肺组织中的mRNA水平和在血清、BALF中的含量显著降低,IL-10和TGF-β1在肺组织中的mRNA水平和在血清、BALF中的含量显著升高,肺组织中PU.1和RORγt蛋白表达水平显著降低,Foxp3蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]金丝桃苷可抑制过敏性哮喘小鼠Th9、Th17细胞分化、促进Treg细胞分化,减轻气道炎症.
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