中药配伍对半夏厚朴汤化学成分及神经炎症作用的影响
Effects of Herbal Compatibility on Chemical Composition and Neuroinflammatory Activity of Banxia Houpo Decoction
摘要[目的]通过超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS)结合多元统计分析中药配伍对半夏厚朴汤化学成分的影响,使用神经炎症和神经损伤细胞模型揭示主要差异成分是否具有抑制神经炎症和神经损伤活性.[方法](1)以UPLC-MS分析半夏厚朴汤水煎液及分煎液(单味药煎煮后合并)的化学成分,正交偏小二乘判别分析(OPLS-DA)分析配伍前后的差异成分.(2)应用脂多糖(LPS)刺激BV2细胞构建神经炎症模型,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活性,Griess法测定细胞一氧化氮(NO)的含量,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量.(3)LPS刺激的BV2细胞培养基(LPS-CM)与SH-SY5Y细胞共培养,建立神经损伤模型,采用CCK-8法检测细胞活性.[结果]UPLC-MS结合OPLS-DA分析得到半夏厚朴汤配伍前后的差异性成分11个,特别是厚朴酚、和厚朴酚在配伍后显著增加.在神经炎症模型中,LPS刺激可增加BV2细胞中促炎因子NO、TNF-α、IL-1β含量升高,5、10 μg/mL的厚朴酚、和厚朴酚均可抑制BV2细胞促炎因子的含量.在神经损伤模型中,LPS-CM可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,5、10 μg/mL的厚朴酚、和厚朴酚均可抑制LPS-CM诱导的神经损伤.[结论]厚朴酚、和厚朴酚在半夏厚朴汤配伍后含量显著增加,能抑制小胶质细胞炎症因子释放和神经元凋亡,其可能是半夏厚朴汤抑制神经炎症和神经损伤的主要活性成分.
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