补阳还五汤对腰椎间盘突出症模型大鼠Sirt1/FOXO3/Wnt/β-catenin通路的影响
Effects of Buyang Huanwu Decoction on the Sirt1/FOXO3/Wnt/β-catenin Pathway in a Rat Model of Lumbar Disc Herniation
摘要[目的]探讨补阳还五汤对腰椎间盘突出症(LDH)大鼠的治疗作用及机制.[方法]采用自体髓核移植法构建大鼠LDH模型,建模后将大鼠随机分为模型组、补阳还五汤组、EX-527(Sirt1抑制剂)组、补阳还五汤+EX-527组,每组12只;另取12只大鼠为假手术组.分组给药2周后,观察大鼠疼痛行为学,测定机械刺激缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射的潜伏期(PWTL),酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清疼痛因子5-羟色胺(5-HT)、神经肽Y(NPY)和炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察腰椎组织病理变化,Western Blot法检测腰椎组织沉默信息调节因子1(Sirt1)、叉头框蛋白O 3(FOXO3)、Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平.[结果]与假手术组比较,模型组大鼠MWT、PWTL,血清5-HT水平,腰椎组织Sirt1、FOXO3蛋白水平降低,血清NPY、IL-6、IL-1β、TNF-α水平和腰椎组织Wnt3a、β-catenin蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05),腰椎间盘内髓核细胞肿胀,髓核间界线不清,纤维环局部撕裂、排列紊乱,炎性细胞浸润增加;与模型组比较,补阳还五汤组大鼠MWT、PWTL,血清5-HT水平,腰椎组织Sirt1、FOXO3蛋白水平升高,血清NPY、IL-6、IL-1β、TNF-α水平和腰椎组织Wnt3a、β-catenin蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05),腰椎间盘内髓核部分萎缩、紊乱,与纤维环边界尚清楚,纤维环结构尚完整,炎性细胞浸润减轻.EX-527可加重LDH大鼠痛敏状态,减弱补阳还五汤对LDH大鼠的镇痛作用,差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]补阳还五汤可抑制LDH大鼠炎性因子释放,提高大鼠疼痛阈值,改善痛敏状态,其作用可能是通过上调Sirt1,促进FOXO3表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活实现的.
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