积雪草苷调节NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路对急性脑梗死大鼠神经炎症的影响
Effects of Asiaticoside on Neuroinflammation in Rats with Acute Cerebral Infarction by Regulating the NF-κB/NLRP3/Caspase-1 Signaling Pathway
摘要[目的]探讨积雪草苷对急性脑梗死(ACI)大鼠的治疗作用及机制.[方法]将大鼠随机分为假手术组,模型组,积雪草苷低、高剂量组和积雪草苷高剂量+脂多糖(LPS)[核因子κB(NF-κB)激活剂]组和尼莫地平组.除假手术组,其他各组大鼠构建ACI模型,分组干预.Zea-Longa评分法评价神经功能;酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测血清神经生长因子(NGF)、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素1β(IL-1β)水平;计算大鼠脑含水量;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积;苏木精-伊红(HE)染色法观察大脑皮层组织病理形态;采用羟胺法检测大脑皮层超氧化物歧化酶(SOD)活性、比色法检测大脑皮层谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、硫代巴比妥酸法检测大脑皮层丙二醛(MDA)含量;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测大脑皮层活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、NF-κB、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达水平.[结果]与假手术组比较,模型组大鼠大脑皮层神经元有明显损伤,神经功能评分,血清LDH、TNF-α、IL-18和IL-1β水平,脑梗死体积百分比和脑含水量,皮层组织MDA含量,cleaved Caspase-3、MMP-9、NF-κB、NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平升高,血清NGF水平,皮层组织SOD和GSH-Px活性降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,积雪草苷低、高剂量组和和尼莫地平组大鼠大脑皮层神经元损伤明显减轻,神经功能评分,血清LDH、TNF-α、IL-18和IL-1β水平,脑梗死体积百分比和脑含水量,皮层组织MDA含量,cleaved Caspase-3、MMP-9、NF-κB、NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平降低,血清NGF水平,皮层组织SOD和GSH-Px活性升高,差异均有统计学意义(P<0.05);积雪草苷高剂量组与尼莫地平组大鼠各项检测指标无统计学差异(P>0.05);LPS可逆转积雪草苷对ACI大鼠的改善作用(P<0.05).[结论]积雪草苷可能通过抑制NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路减轻ACI大鼠神经炎症.
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