换一批尘螨主要变应原Der f1融合基因真核表达载体的构建
Construction of eukaryotic expressing vector for fusion gene of Der f1, a main allergen of dermatophagoides farinae
摘要目的:构建尘螨主要变应原Der f1融合基因真核表达载体,为进一步转染真核细胞表达融合蛋白奠定基础.方法:根据Genebank中Der f1基因的核酸序列(AB034946),设计引物,采用PCR法,从保存的JM109工程菌中扩增Der f1编码基因,将其连接到小鼠IL-12(mIL-12)基因3′端,组成融合基因mIL-12/Der f1,再克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/myc-his A上.结果:经测序、比对,内切酶酶切,证实融合基因片段成功连接并亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/myc-hisA.结论:成功构建了尘螨变应原Der f1和小鼠IL-12融合基因的真核表达载体,为尘螨变应原Der f1融合蛋白的表达奠定了基础.
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