换一批
换一批摘要目的:探讨成人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)体外培养及培养效率的方法.方法:在无菌条件下,取3 cm左右肺动脉,去除内膜后,剪成1 mm×1 mm大小的组织块,贴块法培养,在高糖DMEM/F12 1∶1培养基中加入血小板衍生长因子(PDGF) 10 μg/L培养hPASMCs,采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光法鉴定α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle-α-actin,SM-α-actin)和钙调蛋白calponin.结果:采用改良组织块培养,克服了hPASMCs体外培养休眠期过长的缺点,稳定获得纯度达98％以上,细胞呈长梭型,生长致密时排列成相互平行的束状,未见明显异形的细胞,SM-α-actin和calponin阳性.结论:该改良方法能成功分离和培养出纯度较高的成人肺动脉平滑肌细胞,且重复性好,细胞常量大,简便而有效.
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