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家兔脑微血管内皮细胞的原代培养及鉴定

Primary culture and identification about brain microvascular endothelial cells of rabbits

摘要目的:建立一种简便高效的家兔脑微血管内皮细胞原代培养方法,为开展脑血管疾病及相关研究提供重要的载体和工具细胞.方法:无菌条件下取家兔大脑皮质,经剪碎、过细胞筛网、牛血清白蛋白密度梯度离心、Ⅱ型胶原酶消化后接种培养;通过细胞形态学观察及血管形成实验鉴定所培养的细胞.结果:原代培养48 h后,有少量短梭形的内皮细胞从血管段周围爬出;72 h后,细胞以血管段为中心形成"岛屿样""团簇状"的集落;4~5d后细胞集落间相互融合成片,铺满皿底,呈典型的单层、鹅卵石样、镶嵌式排列.血管形成实验观察到所培养的目的细胞能够形成管腔样结构,结果显示为阳性.结论:该方法可成功分离培养出原代家兔脑微血管内皮细胞.

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