前列腺素D2调控自噬影响胃癌干细胞的干性
Prostaglandin D2 regulation of autophagy affects stemness of gastric cancer stem cells
摘要目的:探究前列腺素D2(Prostaglandins D2,PGD2)对胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)干性的影响及机制.方法:通过无血清培养法富集7901-GCSCs;然后通过流式细胞术检测无血清培养的7901-GCSCs干性标志物CD44的阳性率;通过干细胞成球实验检测不同浓度PGD2(2.5、5、10)μg/mL刺激后的成球能力,并采用Western blot实验检测不同浓度PGD2刺激后干性相关指标(OCT4、CD44)和自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)的表达.采用Western blot实验检测不同浓度CQ(2.5、5、10)μmol/L刺激后自噬相关蛋白的表达.通过Western blot实验检测PGD2以及PGD2+CQ处理后自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)和干性相关指标(OCT4、CD44)的蛋白表达.结果:流式细胞术结果显示,与胃癌细胞SGC-7901相比,无血清培养的 7901-GCSCs中CD44 阳性率表达增加(P<0.05).干细胞成球实验结果表明,与DMSO组相比,PGD2组中7901-GCSCs的成球能力明显减弱(P<0.05).Western blot结果显示,与DMSO组相比,PGD2组中7901-GCSCs的干性相关指标(OCT4、CD44)蛋白表达下调(P<0.05),而自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)表达增加(P<0.05).与DMSO组相比,CQ组中自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)表达降低(P<0.05).Western blot结果还显示,与DMSO组相比,PGD2+CQ组中细胞自噬相关蛋白以及干性相关指标表达并无明显变化,提示CQ可阻断PGD2对7901-GCSCs的干性抑制作用.结论:PGD2可能通过调控自噬影响7901-GCSCs的干性.
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