摘要目的:观察EGCG对心肌细胞衰老和铁死亡的影响.方法:使用不同浓度D-gal构建心肌细胞H9C2衰老模型,检测不同药物浓度作用不同时间下细胞的增殖活性;使用不同浓度EGCG预处理H9C2后再进行衰老模型构建,检测不同药物浓度作用不同时间下细胞的增殖活性;通过线粒体形态观察、亚铁离子(Fe2+)含量检测、活性氧(ROS)检测说明细胞内的铁死亡代谢改变;并进行细胞衰老β-半乳糖苷酶染色、免疫荧光、Western Blot检测细胞衰老蛋白p53、p21,以及铁死亡保护蛋白SCL7A11、GPX4.结果:D-gal对心肌细胞具有浓度依赖性和时间依赖性,呈负相关;EGCG浓度超过5 μmol/L后与衰老的心肌细胞增殖活性呈负相关;衰老H9C2中细胞线粒体出现铁死亡特异性改变,且在用药后改善;衰老H9C2中Fe2+、ROS含量升高,使用EGCG后两者含量均大幅度降低;心肌细胞衰老程度越深,p53、p21 蛋白水平升高,GPX4、SCL7A11蛋白水平降低;使用EGCG预处理后,GPX4、SCL7A11蛋白水平升高,p53、p21蛋白水平下降,荧光结果相同.结论:衰老的心肌细胞中铁死亡程度加重,EGCG可以抑制细胞的衰老以及铁死亡.
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