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结合网络药理学和体外实验探究半边旗抑制鼻咽癌的机制

Exploring the antitumor effects of Pteris semipinnata L on nasopharyngeal carcinoma based on network pharmacology and in vitro experiments

摘要目的:本文拟通过网络药理学结合体外实验探究半边旗(Pteris semipinnata L,PsL)的抗鼻咽癌作用及其机制,为后续研究提供依据.方法:根据文献获得PsL主要活性成分,在PharmMapper数据库获取PsL主要成分相关基因,并从GeneCard、OMIM、PharmGkb、TTD和CTD数据库获取鼻咽癌疾病基因.将药物与疾病的交集基因导入至String平台构建蛋白互作(PPI)网络,通过PPI网络筛选出核心靶点.结合生物信息学对核心靶点进行分析,将筛选出的核心靶点与PsL成分进行分子对接并将结合能低的对接结果进行可视化.同时进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.利用PsL提取物作用于鼻咽癌Hone1 细胞,采用CCK-8 方法检测细胞增殖;Calcein/PI荧光染色检测细胞活性;Annexin V-FITC流式双染检测细胞凋亡,并使用Western blot检测蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、非受体型酪氨酸蛋白激酶(SRC)蛋白表达的变化.结果:获得PsL与鼻咽癌交集基因共 115个.其中,SRC、MAPK1以及RHOA 可能是鼻咽癌治疗的关键靶点.生物信息学分析结果显示SRC在鼻咽癌中异常高表达,分子对接结果显示β-胡萝卜苷、芦丁和芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷与SRC的结合能较低.富集结果分析表明PsL可调节PI3K-AKT信号通路.体外实验结果显示半边旗水提取物可抑制鼻咽癌Hone1细胞增殖及活性,并促进Hone1细胞凋亡.半边旗水提取物可明显下调SRC和p-AKT蛋白的表达.结论:PsL可通过负向调控SRC-AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞的增殖、促进其凋亡.

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