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基于替代分析物的LC-MS/MS检测儿童末梢血中25-羟维生素D方法建立及评价

Establishment and evaluation of an LC-MS/MS method for the detection of 25-Hydroxyvitamin D in children's capillary blood using surrogate analytes

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摘要目的:建立基于同位素替代分析物的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法检测儿童末梢血中25-羟维生素D(25(OH)D).方法:采用同位素标记物 25(OH)D2-d6、25(OH)D3-d3作为替代分析物,25(OH)D3-d6作为内标,通过蛋白沉淀处理后,应用LC-MS/MS方法同时检测换算得到实际标本中25(OH)D2和25(OH)D3的含量.评价该方法的相同浓度下响应值等效性、特异性、线性、检出限(LOD)、定量限(LOQ)、准确度、精密度、基质效应、携带污染和实际样品加标回收率.结果:25(OH)D2和25(OH)D3的响应因子分别为 1.46和 1.04;线性相关系数均>0.995,LOD分别为 0.16和 0.33 ng/mL,LOQ分别为 0.5和 1 ng/mL,替代分析物 25(OH)D2-d6和 25(OH)D3-d3相对回收率在 96.05%～107.07%范围内,批内批间精密度均<10%,基质因子在0.882～1.121,无明显携带污染,样品可室温避光放置24 h,2～8℃下保存7 d.结论:建立了基于替代分析物的LC-MS/MS定量测定儿童末梢血中25(OH)D2和25(OH)D3的方法,该方法简单易行、结果可靠,有望成为儿童或其他采血困难人群的候选方法.

作者刘菲 ^[1] 宋晶晶 ^[1] 曹明鹏 ^[2] 祖琴琴 ^[3] 周曙光 ^[4] 张爱喜 ^[5] 王丽 ^[6] 李明 ^[7] 学术成果认领

作者单位安徽省妇女儿童医学中心合肥市妇幼保健院检验科,安徽合肥 230001 ^[1] 合肥市第二人民医院输血科,安徽合肥 230001 ^[2] 安徽省联合共建学科重点实验室,安徽合肥 230001 ^[3] 安徽省妇女儿童医学中心合肥市妇幼保健院妇产科,安徽合肥 230001 ^[4] 安徽省阜阳市临泉县妇幼保健院公共卫生科,安徽阜阳 236400 ^[5] 安徽省阜阳市临泉县妇幼保健院检验科,安徽阜阳 236400 ^[6] 安徽省妇女儿童医学中心合肥市妇幼保健院儿科,安徽合肥 230001 ^[7]

关键词液相色谱法串联质谱法 25-羟维生素D 末梢血替代分析物 Liquid chromatography Tandem mass spectrometry 25-Hydroxyvitamin D Capillary blood Isotopic Surro-gate analytes

分类号 R446.1（诊断学）

栏目名称

论著

DOI 10.13210/j.cnki.jhmu.20241122.001

发布时间 2025-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）