摘要目的:观察电针血清对氧糖剥夺/复氧糖(OGD/R)后HT22神经元铁死亡的影响,以探讨电针血清对脑缺血后海马神经元潜在的保护机制.方法:将20只雄性SD大鼠随机分为正常组和电针组,每组10只.电针组采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,随后进行为期 14 d的电针治疗.治疗结束后,从腹主动脉采血并制备不同浓度的电针血清,同时收集正常组大鼠血清作为对照.以海马神经元HT22细胞为实验对象,将其随机分为5组:正常组、模型组、电针血清组、诱导剂组、电针血清+诱导剂组.除正常组外,其余各组经历4 h的氧糖剥夺后,再进行24 h的复氧复糖处理,并在复氧复糖期间给予相应的血清处理.诱导剂组和电针血清+诱导剂组在氧糖剥夺前 24 h加入 10 μmol/L的铁死亡诱导剂Erastin.采用CCK-8和LDH试剂盒评估细胞活力和毒性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;透射电镜观察线粒体结构;荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量;比色法试剂盒检测细胞内Fe2+、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;Western blot检测细胞内转铁蛋白受体1(TFR1)、铁蛋白重链多肽1(FTH1)、核受体共激活剂4(NCOA4)、转运蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)和脂氧合酶(LOX)的相对表达量.结果:不同浓度的电针血清(5%、10%、15%、20%)能改善细胞形态并降低细胞毒性(P<0.01),其中10%的浓度效果最佳.与正常组相比,模型组细胞活力降低(P<0.01),细胞毒性和凋亡情况增加(P<0.01),透射电镜显示线粒体肿胀明显,嵴断裂甚至消失,Fe2+、MDA、ROS含量升高(P<0.01),GSH含量降低(P<0.01),FTH1、SLC7A11、GPX4表达降低(P<0.05),TFR1、NCOA4、ACSL4、LOX表达升高(P<0.05).与模型组相比,电针血清组细胞活力升高(P<0.01),细胞毒性以及凋亡情况减少(P<0.05),线粒体形态相对完整,Fe2+、MDA、ROS含量下降(P<0.01),GSH含量升高(P<0.05),FTH1、SLC7A11、GPX4 表达升高(P<0.05),TFR1、NCOA4、ACSL4、LOX表达降低(P<0.05).与模型组相比,诱导剂组细胞活力降低(P<0.01),细胞毒性和凋亡情况增加(P<0.01),线粒体肿胀更为明显,结构进一步破坏,Fe2+、MDA、ROS含量升高(P<0.01),GSH含量降低(P<0.01),FTH1、SLC7A11、GPX4表达降低(P<0.05),TFR1、NCOA4、ACSL4、LOX表达升高(P<0.05).与抑制剂组相比,针刺血清+诱导剂组细胞活力升高(P<0.01),细胞毒性以及凋亡情况减少(P<0.01),线粒体形态结构有所改善,Fe2+、MDA、ROS含量下降(P<0.01),GSH含量升高(P<0.01);FTH1、SLC7A11、GPX4表达升高(P<0.05),TFR1、NCOA4、ACSL4、LOX表达降低(P<0.05).结论:电针血清能有效抑制OGD/R后HT22神经元的铁死亡,从而在改善脑缺血后海马神经元损伤方面发挥重要作用.