基于敌百虫促进DNMT3A表达致空间学习记忆能力下降及海马神经元细胞凋亡
Trichlorfon promotes DNMT3A expression,leading to decreased spatial learning and memory ability and apoptosis of hippocampal neurons
摘要目的:探讨敌百虫暴露对大鼠空间学习记忆能力和神经元细胞的影响,为敌百虫神经毒性的机制研究提供参考.方法:基于前期研究,分别以PBS缓冲液或以10 mg/kg剂量敌百虫灌胃SD大鼠30 d,利用水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力,H&E染色观察海马组织神经元形态,免疫组织化学染色检测5-甲基胞嘧啶(5-mc),TUNEL染色观察细胞凋亡,Western blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达;以 0、160、200、240 μmol/L浓度处理HT-22小鼠海马神经元细胞48 h,Western blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达,流式细胞术检测细胞凋亡;HT-22细胞敲低DNMT3A后200 μmol/L敌百虫干预 48 h,Western blot检测 DNMT3A及凋亡相关基因表达.结果:敌百虫干预后,水迷宫实验结果显示大鼠学习记忆能力降低(P<0.05),H&E染色结果显示海马组织形态学无明显变化,免疫组织化学染色显示海马组织 5-mc水平增高(P<0.05);Western blot结果显示,敌百虫处理后DNMT3A表达上升(P<0.05),凋亡相关基因表达改变(P<0.05),流式细胞术显示细胞凋亡率增加(P<0.05),但敲低DNMT3A可部分逆转敌百虫诱导的细胞凋亡(P<0.05).结论:敌百虫持续暴露导致大鼠认知功能下降,可能与DNMT3A表达升高及DNA甲基化水平升高导致的细胞凋亡有关.
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