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基于周期阻滞和氧化-抗氧化失衡研究槟榔碱致小鼠骨髓细胞DNA损伤的机制

Mechanism of DNA damage in mouse bone marrow cells induced by arecoline based on cycle arrest and oxidation antioxidant imbalance

摘要目的:研究槟榔碱(arecoline,ARC)体内对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用,并探讨其作用机制.方法:采用单细胞凝胶电泳实验分析ARC对小鼠骨髓细胞DNA损伤作用.采用流式细胞术、DCFH-DA荧光染色、罗丹明123染色等方法对小鼠骨髓细胞的细胞周期,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondial dehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,线粒体膜电位(Δψm),p53蛋白含量进行分析.结果:给予ARC1/2 LD50剂量可引起小鼠骨髓细胞DNA损伤,与空白组相比拖尾现象较严重.随着ARC给药剂量的增加,G0/G1期的细胞比例明显增加(P<0.01),使骨髓细胞周期停滞在G0/G1 期.ARC作用小鼠骨髓细胞后,SOD活性和GSH含量明显降低(P<0.01),MDA和ROS含量明显升高(P<0.01),并且随着ARC浓度增加,Δψm明显降低(P<0.01).ARC给药组骨髓细胞内p53蛋白含量随给药剂量的增加而明显升高(P<0.01),呈一定的剂量依赖关系.结论:ARC能造成小鼠骨髓细胞DNA损伤,可增加p53蛋白表达诱导小鼠骨髓细胞周期阻滞在G0/G1 期,引起Δψm降低,ROS增加,脂质过氧化增强,抗氧化功能受到严重损害,氧化和抗氧化失衡,这些是ARC引起小鼠骨髓细胞DNA损伤的机制.

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