白头翁皂苷B4通过调控AMPK/ACC/CPT1A信号通路改善非酒精性脂肪肝小鼠氧化应激水平的研究
Study of anemoside B4 improving oxidative stress levels in mice with non-alcoholic fatty liver disease by regulating the AMPK/ACC/CPT1A signaling pathway
摘要目的:探究白头翁皂苷B4(anemoside B4,AB4)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠的干预作用及可能的分子机制.方法:采用高脂饮食构建NAFLD小鼠模型并以AB4进行干预.实验过程中监测小鼠体质量、葡萄糖耐量及胰岛素耐量;8周后收集血清、肝脏等组织样本,检测总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C);采用H&E染色及油红O染色观察肝脏组织病理学改变和脂质沉积情况;采用免疫荧光方法评估AB4对肝脏代谢性炎症的影响;qRT-PCR及Western blot法检测肝脏组织中腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)、肉碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)mRNA 及蛋白表达水平的变化;分析超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的水平.结果:AB4可明显降低高脂喂养小鼠的体质量,改善小鼠糖耐量异常情况,缓解胰岛素抵抗情况.AB4可改善TC、TG、LDL-C及HDL-C的病理变化;各给药组肝脏病理切片显示损伤程度减轻,肝脏脂肪空泡数量减少;血清MDA水平降低,SOD、GSH-Px水平升高;肝脏炎症因子白细胞介素-6表达减少.此外,给药组肝脏中AMPK、ACC、CPT1A mRNA及蛋白表达升高.结论:AB4能够调节肝脏脂肪代谢与血糖水平、减轻氧化应激反应,且其治疗NAFLD的潜在的作用机制可能与调控AMPK/ACC/CPT1A信号通路有关.
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