摘要目的:探究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)源性外泌体(exosomes,Exo)传递的微小RNA(miR-122)对人肝癌HepG-2细胞生物学活性的调控作用及其分子机制.方法:采用超速梯度离心法从BMSC中分离Exo,并利用透射电镜和Western blot实验进行鉴定;通过电转染技术将miR-122模拟物(miR-122 mimics)及其阴性对照(NC mimics)分别负载至Exo,分别记为NC Exo和miR-122 Exo,RT-qPCR检测两种Exo中miR-122相对表达量;采用外泌体绿色荧光PKH67染料标记NC Exo和miR-122 Exo后再与HepG-2细胞共培养,观察Exo被HepG-2细胞摄取情况;HepG-2细胞分为对照(Control)组、NC Exo组(NC Exo处理细胞)、miR-122 Exo组(miR-122 Exo处理细胞),采用CCK-8法、Transwell小室实验、Western blot实验检测不同条件处理下HepG-2细胞增殖活性、迁移、侵袭能力及上皮间质转化相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达变化;通过生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-122与解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)的靶向调控关系.结果:从BMSC中分离的Exo呈球形状囊泡,直径 30～150 nm,Exo特殊标记蛋白CD9、CD63、HSP70、TSG101均为阳性表达,且负载miR-122 mimics的miR-122 Exo中miR-122相对表达量明显高于负载mimics NC的NC Exo(P<0.05),NC Exo和miR-122 Exo均能够被HepG-2细胞摄取.与对照组比较,NC Exo组HepG-2细胞在培养24、48、72 h时增殖活性均明显升高(P<0.05),细胞迁移与侵袭数量均明显增加(P<0.05),NC Exo组HepG-2细胞中上皮标志物E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而间质标志物N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与对照组、NC Exo组相比,miR-122 Exo组HepG-2细胞在培养24、48、72 h时明显抑制HepG-2细胞增殖(P<0.05),细胞迁移与侵袭数量均明显减少(P<0.05),miR-122 Exo HepG-2 细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而间质标志物N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.05).miR-122与ADAM10的3'-UTR存在结合位点,与miR-NC组比较,在HepG2细胞中转染miR-122可以明显抑制ADAM10 WT的相对荧光素酶活性(P<0.05).结论:通过Exo传递miR-122至HepG-2细胞,能够抑制细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化等生物学行为,其机制可能与靶向抑制ADAM10表达有关.