Torin1调节细胞周期抑制人肝癌HepG2细胞增殖的体外研究
Researd on Torin1 Regulation the Cell Cycle and Inhibition Proliferation of Human Liver Hepatocellular Carcinoma Cell Line ( HepG2 ) in Vetro
摘要目的 研究Torin1 对人肝癌HepG2 细胞生长的影响及其可能机制. 方法 CCK8 法检测不同浓度(0.1,0.5,1.25,2.5,5)μmol· L -1 Torin1 对HepG2细胞48h后细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度(1.25,2.5,5)μmol· L -1 Torin1 处理前后HepG2 细胞周期的变化,Real time PCR和Western blot法检测不同浓度(1.25,2.5,5)μmol· L -1 Torin1处理前后HepG2细胞细胞周期抑制蛋白P27 和细胞周期蛋白A1(cy-clinA1) mRNA表达水平和蛋白表达水平的变化. 结果 Torin1 作用于 HepG2 细胞后,HepG2 细胞增殖明显呈浓度依赖型抑制,1.25,2.5, 5μmol· L -1 Torin1作用于HepG2细胞48 h后,细胞周期S期明显增多,P27 mRNA和蛋白表达水平呈浓度依赖性增加,cyclinA1 mRNA和蛋白表达水平呈浓度依赖性减少. 结论 体外应用Torin1可显著抑制人肝癌细胞HepG2 细胞生长,这可能是通过增加抑制细胞周期蛋白 P27 表达,减少细胞周期蛋白A1的表达来阻碍细胞周期进程.
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