初级纤毛在肺微血管内皮细胞抗缺氧损伤中的作用研究

Effect of Primary Cilia in Anti-hypoxia Damage of Pulmonary Microvascular Endothelial Cells

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摘要目的研究初级纤毛在肺内皮细胞抗缺氧损伤中的作用及机制.方法将肺微血管内皮细胞(PM-VEC)培养至接近融合时,置于密闭缺氧盒中处理0、6、12、18和24h,观察处理不同时间后的细胞形态和初级纤毛长度的变化.用RNA干扰法(siRNA)抑制IFT-88的表达以观察PMVEC初级纤毛的发生情况,同时以无意义干扰序列作为阴性对照组(对照组).将对照组和siRNA组同时置于缺氧环境0、6、12、18和24 h,检测各时间点的活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽氧化物酶(GSP-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果缺氧导致PMVEC细胞受损,且初级纤毛长度较常氧环境下显著增加(P<0.01).IFT88表达被干扰后PMVEC的初级纤毛发生受抑制.对照组PMVEC的ROS、MDA水平在缺氧后逐渐升高,12 h时达到峰值,之后开始下降,24 h后又略有回升;GSH-PX和SOD活性逐渐升高,至12 h时达到峰值,之后持续下降(P<0.01).siRNA组的ROS和MDA水平随着缺氧时间的延长持续升高,GSH-PX和SOD活性无明显变化.结论纤毛参与了胞外缺氧及氧化胁迫信息向胞内的传递并在抗缺氧损伤中发挥了不可或缺的作用.