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miR-199-3p过表达调控肺癌A549细胞生长、侵袭及上皮间质转化机制研究

Mechanism of miR-199-3p Overexpression in Regulating Growth, Invasion and Epithelial-mesenchymal Transformation of Lung Cancer A549 Cells

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摘要目的探究miR-199-3p过表达靶向抑制SOX5对肺癌A549细胞生长、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响.方法荧光素酶实验检测miR-199a-3p与SOX5靶向关系.构建SOX5 pcDNA载体过表达SOX5,将miR-199-3p与pcDNA-SOX5单独或联合转染A549,将细胞随机分为对照组(Control组)、miR-199-3p过表达组(mimic组)、SOX5组和mimic+SOX5组进行后续实验.克隆形成法检测肺癌A549细胞增殖情况,流式细胞术检测肺癌A549细胞凋亡情况,Transwell检测肺癌A549细胞侵袭能力;荧光显微镜观察肺癌A549细胞EMT形态学变化;蛋白免疫印迹试验检测Ki-67、PCNA、Bax、Bcl-2、Caspase-3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平.结果与SOX5组比较,mimic+SOX5组细胞克隆形成率降低,Ki-67、PCNA蛋白水平降低,细胞凋亡率升高,Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高,细胞侵袭数降低,E-cadherin蛋白水平升高,N-cadherin、Vimentin蛋白水平降低(P<0.05).结论 miR-199-3p靶向SOX5抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和EMT,并诱导细胞凋亡.