换一批
换一批摘要采用重叠延伸 PCR（SOE-PCR）法拼接 VH、Linker、VL，优化了 SOE-PCR 中模板量、引物量、退火温度及DNA 聚合酶量。确定了优化的连接条件为：50μL 反应体系中，SfiI-VH-Linker－232 ng，Linker＋-VL-NotI 200 ng，于64.8℃退火，7个循环后，各加入上下游引物1.5μL（10μmol·L－1），再另加 PrimeSTAR HS DNA Polymerase 0.5μL，于62.0℃退火，扩增25个循环。在改进后的连接条件下，可获得高纯度、高丰度的扩增产物，利于抗体库的多样性。
更多相关知识
- 浏览0
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
