换一批小鼠OSTβ 的K70Q突变对OSTα-OS Tβ膜转位的影响
Effect of K70Q mutation of OSTβ on membrane translocation of OSTα-OSTβ
摘要①目的 探讨小鼠有机溶质转运体β亚单位(organicsolutetransporterbeta,OSTβ)的点突变OSTβ(K70Q)对OSTα-OSTβ膜定位的影响.②方法 提取小鼠回肠RNA,克隆OSTα 和OSTβ的编码序列,测序检测OSTβ(K70Q)突变体,进而构建OSTα、OSTβ和OSTβ(K70Q)的双分子荧光互补BiFC表达载体及绿色荧光蛋白GFP融合蛋白,转染HEK-293细胞,于共聚焦显微镜下观察OSTβ(K70Q)对OSTα与OSTβ的相互作用和膜定位的影响.③结果 突变不影响OSTα和OSTβ(K70Q)的相互作用,但阻碍了OSTα-OSTβ(K70Q)复合体的膜转位,并且可通过显性负效应干扰正常OSTα-OSTβ复合体的膜转位.④结论 发现了1个小鼠OSTβ的点突变OSTβ(K70Q),突变不影响OSTα和OSTβ(K70Q)的相互作用,但阻碍了OSTα-OSTβ(K70Q)复合体的膜转位,并且可通过显性负效应干扰正常OSTα-OSTβ复合体的膜转位.
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