换一批猪IgG Ⅱ类Fc受体基因真核表达重组质粒的构建及表达
Construction and Expression of the Eukaryotic Expression Plasmid of Porcine Immunoglobulin G Fc Receptor Ⅱ
摘要利用本研究小组克隆的猪IgG Ⅱ类Fc受体cDNA(swFcγRⅡ)基因序列(DQ026064)设计引物,应用RT-PCR技术,从猪外周血白细胞cDNA中扩增了完整的960 bp swFcγRⅡ ORF序列,利用基因重组技术将swFcγRⅡ ORF基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3,经PCR及双酶切鉴定:扩增出901 bp的PCR产物;Kpn I/EcoR I双酶切,切出5 376和901bp DNA片段,表明重组质粒pcDNA/swFcγRⅡ构建成功.然后脂质体法转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验鉴定了swFcγRⅡ配体亲和特性.
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