换一批
换一批上西早生柿ETR5基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究
Uenishiwase Persimmon ETR5 Gene RNA Interference Expression Vector Construction and Genetic Transformation
摘要据已测序的上西早生柿ETR5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase基因片段.2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断.连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体pSMAK321的35S启动子和NOS终止子之间,构建成Uenishiwase-ETR5基因的RNA干扰植物表达载体.载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA101中.以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200 μmol/L的AS及Spc梯度筛选能有效提高转化率.转化植株经PCR检测得到7株阳性植株.
更多相关知识
关键词
上西早生柿ETR5RNAi植物表达载体转基因Uenishiwase persimmonETR5RNA interference(RNAi)Plant expression vectorTransformation
分类号
Q786
发布时间
2010-05-17
基金项目
河北省自然科学基金（C2006000465）
- 浏览0
- 被引8
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
