换一批正交设计优化扁蓿豆ISSR反应体系的研究
Optimization for ISSR-PCR System of Medicago ruthenica Through Orthogonal Design
摘要以扁蓿豆(Medicago ruthenica)为试材,采用改良的CTAB法提取DNA,利用正交设计L16(45)探讨10×PCRBuffer(含Mg2+)、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶及模板DNA用量对扁蓿豆ISSR-PCR反应的影响,正交试验的结果采用直观分析和方差分析相结合.建立了扁蓿豆的ISSR-PCR优化反应体系,在25 μL反应体系中,TaqDNA聚合酶1.5U,10 × PCR Buffer(含Mg2+)2.0 mmol/L,模板DNA 0.5 ng/μL,dNTPs 0.6 mmoL/L,引物0.9 μmol/L.同时探讨引物HZD09211的最适退火温度为52.3℃.2个不同引物对20份扁蓿豆材料DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示该体系具有较高的稳定性.
更多相关知识
分类号
S551
发布时间
2011-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
农业部农作物种质资源保护与利用项目（NB09-2130135-8）
牧草种质资源保护项目（2009-13）
- 浏览2
- 被引10
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
