摘要为克隆盾叶半夏凝集素基因,并对其功能进行分析。采用 RACE 技术从盾叶半夏中克隆得到盾叶半夏凝集素基因的全长 cDNA 序列,命名为 ppl。同时,构建了 ppl 基因的原核表达载体,并成功实现了33 kDa 重组蛋白在E.coli BL21中的表达。纯化后的重组蛋白 PPL 用于凝血和体外抗癌试验。该基因的全长 cDNA 序列为1504 bp,其中开放性阅读框(ORF)813 bp,编码270个氨基酸,具有3个甘露糖结合识别位点。PPL 具有凝血活性,这种凝血活性可受甘露糖抑制。PPL 对人鼻咽癌细胞(CNE)、人宫颈癌细胞(Hela)及人乳腺癌细胞(Bcap-37)的生长均具有抑制作用,其中对 Hela 细胞的抑制效果最好。为进一步研究 PPL 蛋白的功能奠定了理论基础。
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