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棉铃虫围食膜肠粘蛋白HaIIM72真核表达及几丁质结合活性检测

Eukaryotic expression and analysis of chitin-binding of intestinal mucin HaIIM72 from Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae)

摘要在前期工作中,本实验室已成功克隆得到棉铃虫粘蛋白基因haiim72.为了研究粘蛋白HaIIM72的生化特性,本试验将haiim72基因克隆到质粒pFastBacTM,转化大肠杆菌DH10Bac,构建重组杆状病毒bacmid-haiim72,转染昆虫细胞系BTI-TN-5B1-4 (HighFive)从而在昆虫细胞系中进行表达.结果表明:成功表达了分子量约260 kDa的棉铃虫围食膜肠粘蛋白HaIIM72.几丁质结合活性试验表明,肠粘蛋白HaIIM72具有几丁质结合活性,能够被较强的变性剂洗脱,属于第三类围食膜蛋白.

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