大量提取拟南芥保卫细胞原生质体方法的优化
Optimization on large-scale isolation of guard cell protoplasts from Arabidopsis thaliana
摘要保卫细胞在植物的生理和发育过程中发挥着重要作用,由于拟南芥作为研究材料自身的优越性,其保卫细胞成为研究信号转导机制的良好系统,对于基因组学和蛋白质组学分析具有重要意义.然而,大量获取保卫细胞原生质体存在一定的难度.本研究以拟南芥为材料,在两步酶解法的基础上,改用更加经济的纤维素酶,摸索酶浓度及酶解时间,旨在获得一套可以快捷、高效、低成本提取保卫细胞原生质体的方法.结果表明:黑暗条件下,22℃,酶解液Ⅰ酶解1h,酶解液Ⅱ(纤维素酶Onozuka R-10浓度2.5%)酶解2h,可最大量地收集原生质体.
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