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拟南芥开花抑制基因TFL1多克隆抗体的纯化与特异性检测

Purification of flowering repressive gene TFL1 Polyclonal antibody and specificity detection in Arabidopsis thaliana

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学术成果认领

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摘要为了获得敏感性和特异性高的TFL1多克隆抗体,本研究构建了GST-TFL1和His-TFL1原核表达载体并转入大肠杆菌表达菌株BL21中.经IPTG诱导和蛋白纯化,成功获得了分子量约为46 kD的GST-TFL1和22 kD的His-TFL1融合蛋白.利用纯化的融合蛋白His-TFL1作为抗原免疫,获得了TFL1的多克隆抗体血清.抗体血清经偶联了GST-TFL1融合蛋白的纯化基质进行免疫亲和纯化获得了纯化的TFL1多克隆抗体.免疫印迹检测抗体敏感性和特异性发现,纯化后的抗体不仅能特异地识别细菌内纯化的GST-TFL1和His-TFL1融合蛋白,也能与拟南芥中TFL1蛋白发生特异性反应.该研究结果为深入研究TFL1抑制植物开花的分子机制提供了有力的工具.

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作者袁敏 ^[1] 张越 ^[2] 王莉 ^[1] 葛伟娜 ^[1] 张岚 ^[1] 邢继红 ^[3] 学术成果认领

作者单位华北理工大学生命科学学院/基因组学和计算生物学研究中心,河北唐山,063000 ^[1] 南京农业大学植物保护学院,江苏南京,210000 ^[2] 河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室,河北保定,071001 ^[3]

关键词 TFL1 多克隆抗体亲和纯化特异性敏感性 TFL1 polyclonal antibody affinity purification specificity sensitivity

分类号 Q71

DOI 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0028

发布时间 2017-05-16

基金项目

国家自然科学基金（31401212）；河北省自然科学基金（C2014209134）

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2017年40卷2期

18-23页

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