换一批密码子优化提高猪IL-7在HEK293T细胞表达的研究
Codon optimization enhances porcine interleukin-7 expression in HEK293T cells
摘要为提高重组猪白细胞介素-7(pIL-7)在人胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达,依据人偏爱的密码子对pIL-7基因进行了优化修饰,然后用pcDNA3.1A质粒构建其与Myc/His-标签融合的真核表达载体.将此表达载体和过去构建的野生型pIL-7表达载体分别转染HEK293T细胞进行表达,利用镍-琼脂糖凝胶颗粒从培养基中纯化表达的重组pIL-7,比较二者的表达水平.结果显示,密码子优化后pIL-7基因在HEK293T细胞中的表达水平为(45±3.2) μg/T25细胞瓶,比野生型pIL-7基因的表达水平(21±1.8) μg/T25细胞瓶,提高了2倍多,可见密码子优化可明显提高重组pIL-7在HEK293T细胞中的表达.这为猪IL-7的生物学功能的研究提供了必要条件.
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