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22种金花茶聚合酶链反应-限制性片段长度多态性研究

摘要研究 22种金花茶(Camellia petelotii)聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP),为建立金花茶PCR-RFLP生物鉴定方法提供依据.选用叶绿体基因rbcL序列和限制性内切酶Sacll,研究限制性内切酶Sacll对22种金花茶rbcL引物PCR扩增序列的酶切反应.结果表明,用Sacll限制性内切酶对22种金花茶rbcL引物PCR扩增产物进行酶切,扶缓金花茶和中东金花茶的扩增序列不能被酶切,其余20种金花茶酶切位点基本一致,均可被切为大小不等的2个片段,其中较小片段出现在100~250 bp,较大片段出现在250~500 bp.利用限制性内切酶Sacll对22种金花茶rbcL引物PCR扩增序列进行酶切,可将扶绥金花茶和中东金花茶与其他种金花茶进行区分,该方法可用于补充和完善金花茶药材的真伪鉴别方法,为金花茶良种的繁育与推广做好良种资源贮备和数据支撑.

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