摘要目的 构建骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧光融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,然后再用其在体外转染犬牙髓细胞,探讨BMP2基因转染对牙髓细胞BMP2基因表达的影响,及是否表达BMP2蛋白.方法 构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的犬牙髓细胞,检测转染后细胞的BMP2基因表达及蛋白表达情况.结果 成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,对构建的BMP2真核重组质粒用XhoI、HindIII进行双酶切,其产物进行琼脂糖凝胶电泳后,在1.2kb、4.7kb可见2条特异条带;并进行全基因序列测序,报告100%符合,证明pEGFP-N1-BMP2重组质粒构建成功.转染后的细胞可见BMP2基因表达,细胞免疫组织化学检测转染后的细胞中有BMP2蛋白的表达.结论 pEGFP-N1-BMP2 真核表达质粒转染后的牙髓细胞能够表达BMP2基因,BMP2蛋白表达阳性.
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